RNA-Impfstoffe (Coronawahn)

mrna, Wednesday, 25.11.2020, 08:44 (vor 1242 Tagen)

Im Internet gefunden:

Um in die DNA eingebaut zu werden, müsste die mRNA aus den Impfstoffen in menschlichen Zellen in DNA zurückgeschrieben werden. Denn sie ist nicht nur einzelsträngig, sondern auch chemisch anders aufgebaut als DNA. Das geschieht aber nicht, auch nicht mit der in Massen vorhandenen mRNA aus der Proteinbiosynthese, denn hierfür sind zwei Enzyme nötig: die Reverse Transkriptase (eine RNA-abhängige DNA-Polymerase) und die Integrase. Beide sind in menschlichen Zellen nicht vorhanden.

https://www.pharmazeutische-zeitung.de/warum-mrna-impfstoffe-nicht-das-erbgut-veraendern-121972/seite/alle/

Für eine Integration von DNA in das Genom von eukaryotischen Zellen wie z.B. menschlichen Zellen ist keine Integrase, wie sie z.B. HIV besitzt, erforderlich.[13,14] Dies können zelleigene Enzyme erledigen. So besitzt z.B. HBV eine reverse Transkriptase, aber keine Integrase, dennoch kann das HBV-Genom in das Wirtszellgenom integriert werden.[15,16]
Natürlich ist es vorteilhafter, wenn ein Virus ein Enzym wie die Integrase bereits mitbringt, so entfällt die Abhängigkeit von der Maschinerie der Wirtszelle in diesem Punkt, zudem dürfte eine evolutionär entstandene Integrase für das spezifische Virusgenom und das Wirtsgenom optimiert sein und eine Integration wahrscheinlich schneller und fehlerfreier zustande bringen.

Menschliche Zellen verfügen über reverse Transkriptasen. Einerseits hat die Telomerase eine reverse Transkriptasefunktion, welche durch NRTIs gehemmt werden kann[17,18], andererseits gibt es Retrotransposone wie LINE1 (L1), welche reverse Transkriptasen kodieren, im menschlichen Erbgut.19 Ein Teil des Retrotransposons L1 konnte übrigens im Genom von Neisseria gonorrhoeae nachgewiesen werden.[1]

Interessanterweise könnte eine Infektion mit Coronaviren wohl zu einer Hochregulierung von Retrotransposonen führen, wahrscheinlich durch eine Verstärkung der allgemeinen DNA-Demethylierungsaktivität. Experimentell wurden dabei auch chimäre Transkripte von SARS-CoV-2-RNA mit RNA von Retrotransposonen wie LINE gefunden, so daß auch eine Integration dieser gemischten Transkripte in die Wirts-DNA denkbar erscheint.[12] (Achtung: Preprint!)

Die Enzyme gehören aber zur Ausstattung von verschiedenen RNA-Viren, die ihr Genom in das menschliche Genom einbauen. Das bekannteste Beispiel ist das HI-Virus. Daher wäre es theoretisch möglich, dass bei unbehandelten HIV-Infizierten oder bei Personen, die mit anderen Retro- oder Lentiviren infiziert sind, ein Umschreiben erfolgt, falls der mRNA-Impfstoff und das Virus sich zufällig in derselben Körperzelle befinden. Auch in diesem höchst unwahrscheinlichen Fall wird es aber nicht zu einem Umschreiben der Impf-RNA in DNA kommen, da für den Start der Reversen Transkription ein sogenannter Primer benötigt wird. Diese kurze Startsequenz bringt das Virus selbst in die Zelle mit.

https://www.pharmazeutische-zeitung.de/warum-mrna-impfstoffe-nicht-das-erbgut-veraendern-121972/seite/alle/

Nun bringt HIV zwar tRNALys Isoacceptor 3 (tRNALys3) als Primer im Virion mit, aber bei dem Primer handelt es sich um einen Primer zellulären Ursprungs, welcher auch so in Zellen vorhanden ist, aber im Rahmen des Replikationsprozesses dann im Virion im Vergleich zum Zytoplasma unter Verwendung der Wirtsmaschinerie angereicht wird.[6] Neben 2 Kopien der viralen RNA (vRNA) enthält ein Virion auch geschätzt 20-770 tRNA-Kopien.[5]
Interessanterweise wird auch tRNALys1,2 in die Virionen gepackt, welches aber nicht als Primer der reversen Transkription agiert. Im sehr geringen Ausmaß kann wohl auch tRNALys5 als Primer für HIV agieren.[3]
Andere Retroviren nutzen andere tRNA, HTLV-1 z.B. tRNAPro. Eine recht aktuelle Übersichtsarbeit zur Rolle der Wirts-tRNAs bei der retroviralen Replikation findet sich in JBC Reviews.[4] Die Übersichtsarbeit enthält auch eine schematische Zeichnung zur Rolle der tRNA.
Der Transport des tRNA-Primers im Virion ergibt aus evolutionärer Sicht sicherlich Sinn, da so eine reverse Transkription schneller begonnen werden kann, zumal die Primer sich innerhalb des Kapsids befinden, welches das virale Genom im Zytoplasma bis zum Eintritt in den Zellkern vor zelleigenen Erkennungsmechanismen schützt. Das bedeutet aber nicht, daß eine reverse Transkription von HIV ohne diesen Primer im Virion in einer neu infizierten Zelle unbedingt scheitern müsste. Ich habe aber nun nicht nach ensprechenden Experimenten dazu gesucht. Hier ist meiner Ansicht nach entscheidend, wie lange würde es dauern, in der neu infizierten Zellen umherschwimmendes tRNAlys3 als Primer nutzen zu können, im Vergleich zur Erkennung von Kapsid und viraler RNA durch intrazelluläre Mechanismen und deren Abbau. Wenn der Primer schon von der vorherigen Zelle im Virion mitgenommen wird und sich schon im Kapsid befindet, ergibt sich dadurch natürlich ein Vorteil, den Replikationszyklus schneller zu beginnen und damit schneller vollenden zu können.

Es gibt diverse Viren, welche sich phylogenetisch ins Genom von Eukaryonten integriert haben, obwohl sie keine Retroviren sind. Interessanterweise sind darunter auch RNA-Viren ohne reverse Transkriptase wie Bornaviren.10,20 Bornaviren replizieren sich allerdings im Zellkern, wo auch die Transkription erfolgt. Bornaviren sind einzelsträngige RNA-Viren. Interessanterweise konnte auch gezeigt werden, daß moderne Bornaviren (BDV) bei Säugetieren in der Lage sind, DNA-Formen zu produzieren, welche zur Insertion von EBLN-artigen (Endogene Bornavirus-artige [Elemente], welche sich vom N-Gen ableiten) Elementen in das Wirtsgenom führten.[10]

Auch das EMC-Virus (Encephalomyocarditis Virus; EMCV), ein einzelsträngiges RNA-Virus ohne Envelope und ohne eigene reverse Transkriptaseaktivität aus der Familie der Picornaviren (Picornaviridae), kann in das Genom des Wirts integriert werden. Nach den experimentellen Daten war hier die Telomerase-reverse-Transkriptase (TERT) nicht beteiligt, die Autoren vermuten andere endogene Elemente wie LINE-1 als Quelle der reversen Transkriptaseaktivität. Hier konnte sogar ein Übergang in die Keimbahn nach Integration in die DNA von Zellen in Mäusehoden gezeigt werden, was zur Weitergabe des Virus an die nächste Generation führte, es erfolgte also eine Endogenisierung eines nicht-retroviralen Virus.[11] (Achtung; Preprint!)

Ein horizontaler Gentransfer von doppelstrangigen RNA-Viren auf das Genom im Zellkern eukaryotischer Zellen scheint sehr verbreitet zu sein.[7]

Bei der Fruchtfliege (Drosophila melanogaster) wurde z.B. beobachtet, daß die Persistenz von RNA-Viren durch die kombinierte Aktion zellulärer reverse-Transkriptaseaktivität und dem RNAi-(RNA-vermittelte Interferenz)-Signalweg erreicht wird.[8] Antivirale RNAi hat bei Insekten und Säugetieren Parallelen und Unterschiede.[9]

Angesichts der Hinweise von Integrationen viralen Erbmaterials auch von einfachen, einzelsträngigen RNA-Viren in das Genom von Wirtszellen, würde ich ein Risiko einer Integration von RNA, welches in RNA-Vakzinen zum Einsatz kommt, nicht generell ausschließen. Entscheidend dürfte zur Beurteilung der Gefährlichkeit von RNA-Vakzinen meiner Ansicht nach sein, inwiefern diese RNA in den Zellkern gelangen kann, um dort durch zelleigene reverse Transkriptasen in DNA umgeschrieben und durch andere zelleigene Enzyme als DNA in das Genom integriert zu werden. Wie bei Bornaviren muß z.B. auch HBV in den Zellkern gelangen, bevor eine Transkription und Replikation beginnen kann.
Inwiefern in präklinischen Studien ein möglicher Transfer in den Zellkern eingehend, ggf. auch bei häufigen viralen Infektionen, welche den Transport des viralen Erbguts in den Zellkern für eine erfolgreiche Replikation erfordern, untersucht wurde, weiß ich nicht, vielleicht wird dazu etwas in den Assessment Reports der EMA stehen, falls entsprechende Vakzine in der EU zugelassen werden.

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1 Opportunity and Means: Horizontal Gene Transfer from the Human Host to a Bacterial Pathogen: https://mbio.asm.org/content/2/1/e00005-11.long
2 Neisseria gonorrhoeae and humans perform an evolutionary LINE dance: https://www.tandfonline.com/doi/full/10.4161/mge.1.1.15868
3 Low-level alternative tRNA priming of reverse transcription of HIV-1 and SIV in vivo: https://retrovirology.biomedcentral.com/articles/10.1186/s12977-019-0473-2
4 Role of host tRNAs and aminoacyl-tRNA synthetases in retroviral replication: https://www.jbc.org/content/294/14/5352.full
5 Advances in understanding the initiation of HIV-1 reverse transcription: https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S0959440X20301354
6

Primer tRNAs are selectively packaged into retroviruses during their assembly, i.e., their concentration in the low molecular weight RNA population increases in the virus over that found in the cytoplasm. For example, tRNATrp increases from 1.4% to 32% in avian retroviruses (3), while tRNALys (i.e., all 3 major tRNALys isoacceptors) increases from 5% to 6% to 50% to 60% in HIV-1 (4). In HIV-1, estimates of approximately 20 molecules of tRNALys/virion have been reported, with about 8 molecules tRNA Lys3 and 12 molecules tRNALys1,2 per virion, reflecting their cytoplasmic ratio (5). The function of tRNALys1,2 in the HIV-1 life cycle is unknown.

tRNALys3: The Primer tRNA for Reverse Transcription in HIV-1: https://iubmb.onlinelibrary.wiley.com/doi/abs/10.1080/15216540211469
7 Widespread Horizontal Gene Transfer from Double-Stranded RNA Viruses to Eukaryotic Nuclear Genomes: https://jvi.asm.org/content/84/22/11876.long
8 RNA-mediated interference and reverse transcription control the persistence of RNA viruses in the insect model Drosophila: https://www.nature.com/articles/ni.2542
9 Antiviral RNAi in Insects and Mammals: Parallels and Differences: https://www.mdpi.com/1999-4915/11/5/448/htm
10 Endogenous non-retroviral RNA virus elements in mammalian genomes: https://www.nature.com/articles/nature08695
11 Heritable endogenization of an RNA virus in a mammalian species : https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2020.01.19.911933v1.full-text
12 Exogenous coronavirus interacts with endogenous retrotransposon in human cells: https://doi.org/10.21203/rs.3.rs-40063/v1
13 Integrase-independent HIV-1 infection is augmented under conditions of DNA damage and produces a viral reservoir: http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0042682212000979
14 Mutations in the Human Immunodeficiency Virus Type 1 Integrase D,D(35)E Motif Do Not Eliminate Provirus Formation: http://jvi.asm.org/content/72/6/4678.full
15 Insights into Hepatitis B Virus DNA Integration-55 Years after Virus Discovery: https://www.cell.com/the-innovation/fulltext/S2666-6758(20)30034-5
16 HBV DNA integration: molecular mechanisms and clinical implications: https://www.mdpi.com/1999-4915/9/4/75/htm
17 In Vitro and Ex Vivo Inhibition of Human Telomerase by Anti-HIV Nucleoside Reverse Transcriptase Inhibitors (NRTIs) but Not by Non-NRTIs: http://journals.plos.org/plosone/article?id=10.1371/journal.pone.0047505
18 Inhibition of Telomerase Activity by Human Immunodeficiency Virus (HIV) Nucleos(t)ide Reverse Transcriptase Inhibitors: A Potential Factor Contributing to HIV-Associated Accelerated Aging: http://jid.oxfordjournals.org/content/207/7/1157.full
19 Recombination of Retrotransposon and Exogenous RNA Virus Results in Nonretroviral cDNA Integration: http://www.sciencemag.org/cgi/content/abstract/323/5912/393
20 Virology: Bornavirus enters the genome: http://www.nature.com/nature/journal/v463/n7277/full/463039a.html